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4 ', 6-diamidino-2-phenylindole dihydrochloride
保存條件 Store at -20℃, protect from light.DAPI基本信息:
級(jí)別/純度:BR,98%
CAS:28718-90-3
分子式: C16H15N5·2HCl
分子量: 350.25
MDL: MFCD00012681
4 ', 6-diamidino-2-phenylindole dihydrochloride
DAPI性質(zhì):
1. 外觀:黃色粉末
2. 純度:≥95% (HPLC)
3. 產(chǎn)品描述:
DAPI是一種可對(duì)DNA 染色的細(xì)胞核染色試劑,它在嵌入雙鏈DNA后釋放藍(lán)色熒光。DAPI常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。盡管DAPI不能通過(guò)活細(xì)胞膜,但卻能穿透擾亂的細(xì)胞膜而對(duì)核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用來(lái)檢測(cè)酵母線粒體DNA,葉綠體DNA,病毒DNA,microplasm DNA以及染色體DNA。DAPI-DNA復(fù)合物的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為360nm和460nm。
4. 染色過(guò)程
?。?) 用1mL ddH2O將DAPI溶解,制得2.9mM的DAPI溶液(1mg DAPI/1mL H2O)。
注:DAPI不能直接用PBS等緩沖溶液溶解,需要先用水將其溶解。
?。?) 取適量DAPI水溶液加到PBS中,制備成10~50µM的DAPI溶液。
推薦以下PBS的配制方法:
將8.0g NaCl、0.2g KCl、2.9g Na2HPO4·12H2O、0.2g KH2PO4 溶解于1L純水中。
?。?) 將1/10培養(yǎng)基體積的DAPI溶液加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中。也可以用1/10濃度的DAPI緩沖液代替培養(yǎng)基。
?。?) 在37℃培養(yǎng)細(xì)胞10~20分鐘。
(5) 用PBS或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次。
(6) 用帶有360nm激發(fā)波長(zhǎng),460nm發(fā)射波長(zhǎng)的濾光片的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。
儲(chǔ)存條件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。
注意事項(xiàng):
DAPI對(duì)人體有一定刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。
為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。